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上海研域生物操作常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
發(fā)布時(shí)間： 2024-11-08 點(diǎn)擊次數(shù)： 948次上海研域生物用質(zhì)保價(jià)優(yōu)的產(chǎn)品回饋每一位客戶，常見(jiàn)細(xì)胞品質(zhì)完善同時(shí)做好售后服務(wù)，如果您購(gòu)買我們的產(chǎn)品出現(xiàn)了問(wèn)題，都將會(huì)一一的為您解決問(wèn)題。科研試劑在實(shí)驗(yàn)室中的選擇尤為重要，大家始終都是希望能夠優(yōu)化地實(shí)現(xiàn)其實(shí)驗(yàn)效果。因此，我公司非常重視“誠(chéng)信"建設(shè)，輔佐大家完成漂亮的實(shí)驗(yàn)。
細(xì)胞系（cell line）指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。 也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。（由此便引申出了后來(lái)的有限細(xì)胞系（FiniteCellLine）、無(wú)限細(xì)胞系（InfiniteCellLine）），因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞（特定環(huán)境下口語(yǔ)和書面語(yǔ)都使用），廣義是指可傳代的細(xì)胞。細(xì)胞傳代：
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000rpm離心5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1：2比例分到新的含8mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000rpm條件下離心4min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。將凍存管放入-80℃冰箱，24h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
復(fù)蘇細(xì)胞：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000rpm條件下離心3min，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
上海研域生物一直處在生物科技產(chǎn)業(yè)，常見(jiàn)細(xì)胞生產(chǎn)的產(chǎn)品質(zhì)量有保證，含量高，能夠給實(shí)驗(yàn)帶來(lái)準(zhǔn)確的結(jié)果。同時(shí)試劑隨貨附帶質(zhì)檢報(bào)告和圖譜，能為用戶更好的解決各種疑難問(wèn)題。