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研域共享：關(guān)于生物試劑的洗刷方法
發(fā)布時(shí)間： 2020-04-28 點(diǎn)擊次數(shù)： 1996次洗刷是實(shí)驗(yàn)操作進(jìn)程中看似很簡(jiǎn)單但又至關(guān)重要的一個(gè)進(jìn)程，所以今日我司給一些建議和輔導(dǎo)來(lái)給你們廣泛一下生物試劑這方面小常識(shí)。一同來(lái)看看吧！
1. 自動(dòng)洗板機(jī)：每孔參與洗刷液350μl，注入與吸出距離60秒。洗板5次。
?2. 手藝洗板：甩盡孔內(nèi)液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗刷液350μl，浸泡1-2分鐘，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體，在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
生物試劑實(shí)驗(yàn)初步前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫；試劑或樣品制造時(shí)，均需充沛混勻，并盡量避免起泡。
1.加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，留意不要有氣泡，加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，悄然晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜，37℃孵育2小時(shí)。為確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)運(yùn)用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體，甩干，每個(gè)孔中參與Detection Ab工作液 100μl(在運(yùn)用前15分鐘內(nèi)制造)，酶標(biāo)板加上覆膜，37℃溫育1小時(shí)。
3.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)制造)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時(shí)。
5.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，方法同進(jìn)程3。
6.每孔加底物溶液100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)踐顯況酌情縮短或延伸，但不可超過(guò)30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔呈現(xiàn)明顯梯度時(shí)，即可中止)。
7.每孔加中止液50μl，中止反響，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)。中止液的參與次第應(yīng)盡量與底物液的參與次第相同。
8.生物試劑立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)丈量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提早翻開(kāi)酶標(biāo)儀電源，預(yù)熱儀器，設(shè)置好檢測(cè)程序。
9.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將未用完的試劑按規(guī)則的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。